ABSTRACT
La hemólisis es una causa frecuente de rechazo de muestras que genera un sesgo negativo en la determinación de bilirrubina total (BT). Los objetivos de este trabajo fueron determinar el grado de hemólisis (GH) para reemplazar la inspección visual subjetiva, establecer la magnitud de su interferencia y conocer la concentración inicial de hemoglobina a partir de la cual se produce interferencia clínicamente relevante (ICR). Se recolectaron sueros con diferentes concentraciones de BT. Se preparó un hemolizado para generar distintas concentraciones de interferente. Se cuantificó la BT mediante el método de diclorofenildiazonio en los sueros con las diferentes concentraciones de hemoglobina y se determinó GH midiendo absorbancia a 578 nm. Se consideró ICR cuando se superó la máxima inexactitud deseable. Para cada nivel de BT se determinó la concentración de hemoglobina máxima aceptable (CHbmáx aceptable) por sobre la cual se considera ICR. La Abs578 permitió definir cuatro GH (GH1, GH2, GH3 y GH4). A partir de los interferogramas se determinó la CHbmáx aceptable para cada nivel de BT; ésta mostró un aumento lineal con la BT. A partir de 14,8 mg/dL de BT no se encontró ICR en los rangos estudiados. El GH permite tomar conductas objetivas ante muestras hemolizadas según el algoritmo propuesto.
Hemolysis is a common cause for rejection of samples that generates a negative bias in total bilirubin (TB) determination. The objectives of this study were to determine the hemolysis degree (HD) to replace the subjective visual inspection, to establish the extent of their interference and to meet the initial hemoglobin concentration from which clinically relevant interference (CRI) occurs. Sera was collected at different TB concentrations.Hemolysate was prepared to generate different concentrations of interfering. TB was quantified by dichlorophenyldiazonium method in sera with several hemoglobin concentrations, and DH was determined by measuring absorbance at 578 nm (Abs578). CRI was considered when it exceeded the maximum desirable inaccuracy. For each TB level, the maximum acceptable concentration of hemoglobin (CHbmáx acceptable) above which ICR is considered was determined.The Abs578 made it possible to define four DH (DH1, DH2, DH3 and DH4). The CHbmax acceptable was determined for each level of TB from the interferograms; it showed a linear increase with TB. From 14,8 mg/dL BT, CRI was not found in the ranges studied. The DH makes it possible to have objective behaviours in hemolyzed samples according to the proposed algorithm.
A hemólise é uma causa frequente de rejeição de amostras que gera um viés negativo na determinação da bilirrubina total (BT). Os objetivos deste estudo foram: determinar o grau de hemólise (GH) para substituir a inspeção visual subjetiva, estabelecer a extensão da sua interferência e conhecer a concentração inicial de hemoglobina a partir da qual ocorre a interferência clinicamente relevante (ICR). Foram coletados soros com diferentes concentrações de BT. Um hemolisado foi preparado para gerar diferentes concentrações de interferente. Foi quantificada a BT pelo método de diclorofenil diazônio nos soros com as diferentes concentrações de hemoglobina e foi determinado o GH medindo a absorvância a 578 nm (Abs578). ICR foi considerada quando se superou a máxima inexatidão desejável. Para cada nível de BT foi determinada a concentração de hemoglobina máxima aceitável (CHbMax aceitável) acima da qual é considerada ICR. A Abs578 permitiu definir quatro GH (GH1, GH2, GH3 e GH4). A partir dos interferogramas se determinou a CHbMax aceitável para cada nível de BT; ela apresentou um aumento linear com a BT. A partir de 14,8 mg/dL de BT, a ICR não foi encontrada nos intervalos estudados. O GH permite ter condutas objetivas diante de amostras hemolisadas de acordo com o algoritmo proposto.